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      NTRK1 基因編碼原肌球蛋白相關(guān)激酶 A (TRKA)，這是一種高親和力的神經(jīng)生長(zhǎng)因子 （NGF）受體，從而誘導(dǎo) TRKA 的磷酸化和激酶活性 。TRKA 是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因 子受體激酶家族的成員，該家族還包括 TRKB 和 TRKC(分別由 NTRK2 和 NTRK3 基因編碼)，腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 3 (NT3)的受體。在正常組織中， TRKA 通過(guò) NGF 介導(dǎo)的二聚化進(jìn)行激活，誘導(dǎo)特定殘基的自磷酸化和一系列底物的 轉(zhuǎn)磷酸化，從而激活 PI3K/AKT、Ras/MAPK 和 PLCγ通路。

      TPM3-TRK 癌基因是染色體內(nèi) 1q22-23 重排的結(jié)果，導(dǎo)致原肌球蛋白 3 基因(TPM3)與 一個(gè)序列融合，該序列編碼一種假定的新型跨膜激酶 TRK(原肌球蛋白受體激酶)的 跨膜和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。TPM3 直接和表達(dá)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)區(qū)域的 NTRK1 連接，異常表達(dá) TPM3- TRKA 嵌合蛋白。這種基因的改變破壞了細(xì)胞中配體 NGF 與 TRKA 的相互作用，胞內(nèi) TRKA 處于過(guò)度表達(dá)和持續(xù)激活狀態(tài)，而下游的 PI3K/AKT、RAS/MAPK 和 PLCγ三條信 號(hào)通路也處于異常活躍狀態(tài)，從而驅(qū)動(dòng)癌癥的發(fā)生。TPM3 和 NTRK1 基因融合常見(jiàn)于嬰兒 纖維肉瘤、甲狀腺腫瘤、結(jié)腸腫瘤、肺腫瘤、黑色素瘤、胃腸道間質(zhì)瘤等。

      BaF3（小鼠原 B 細(xì)胞）的生長(zhǎng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達(dá)激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅(qū)動(dòng)基因，讓 BaF3 不再依賴(lài) IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴(lài)的驅(qū)動(dòng)基因，用于評(píng)估小分子藥物對(duì)激酶的靶向抑制作用，原理及流程見(jiàn)下圖所示。
 

Figure 1. TPM3-NTRK1 [G667C] BaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖

1. WB of  TPM3-NTRK1-G667C/BaF3 expression

Figure 2. WB of  TPM3-NTRK1-G667C/BaF3

2. Sanger of  TPM3-NTRK1-G667C/BaF3

Figure 3. TPM3-NTRK1-G667C/BaF3 Fusion
 

Figure 4. TPM3-NTRK1-G667C/BaF3 Mutation

3. Anti-proliferation assay

Figure 5. CTG Proliferation Assay of BaF3 TPM3-NTRK1 [G667C] BaF3 (C1).