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新聞動態 / news
人結腸癌細胞株進行液氮儲存要注意些什么？
原載自：www.0414bw.com[行情動態] 2025-11-19 瀏覽次數：194
細胞株預處理環節不容小覷。首先得確保所培養的細胞處于對數生長期，此時細胞活力旺盛、狀態穩定，適合進行后續操作。收集細胞時，要采用溫和的胰酶消化法，嚴格控制消化時間與溫度，避免過度消化損傷細胞結構；接著用含血清的培養基終止反應，輕柔吹打制成單細胞懸液，隨后離心沉淀細胞，棄去上清液，為防凍保護劑的加入做好準備。
精心挑選適配的防凍保護劑。常用的DMSO能有效降低冰點、減少冰晶形成，保護細胞免受低溫損害。一般配置濃度在5%-10%，過高可能產生毒性，過低則起不到防護作用。將適量DMSO緩慢加入細胞沉淀，輕輕混勻，讓細胞充分浸潤其中，這一步動作要輕緩，防止細胞因劇烈沖擊受損。
規范的分裝流程至關重要。把處理好的細胞懸液按需求分裝到無菌凍存管中，每管容量不宜過多，通常1-2毫升為宜，預留一定空間防止液體膨脹破裂凍存管。密封好后，做好清晰標記，注明細胞名稱、代次、日期等關鍵信息，方便日后查找取用。
循序漸進的降溫過程是核心步驟。直接投入液氮會使細胞瞬間遭受巨大溫差而死亡，需借助程序降溫儀，以每分鐘1℃-3℃的速率緩慢降溫至-80℃左右，再放入液氮罐長期儲存；若沒有專業儀器，也可將凍存管置于厚壁泡沫盒等隔熱材料中，層層包裹棉花，放置在-80℃冰箱過夜后再轉移至液氮環境。
日常管理也不容忽視。定期檢查液氮罐內液位高度，及時補充液氮，保證細胞始終浸沒在液氮之下；拿取細胞時戴好防護手套，防止凍傷，嚴格遵循無菌操作原則，避免交叉污染，如此才能確保人結腸癌細胞株在液氮“呵護”下長久維持活性，為科研持續助力。
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