淋巴細胞活化基因3（Lymphocyte-activation gene 3，LAG-3），又稱為CD233，由Triebel等人于1990年發現。LAG-3是一個Ⅰ型跨膜蛋白，屬于免疫球蛋白（Ig）超家族，主要表達在T細胞和NK細胞表面。LAG-3基因位于第12號染色體，LAG-3蛋白由胞外區、跨膜區和胞質區3個部分組成，LAG-3的胞外區有4個免疫球蛋白超家族類似（IgSF-like）結構域（D1-D4），D1結構域中有一個環狀結構，使LAG-3可以與MHC II（major histocompatibility complex II，MHC II）類分子結合，LAG-3的胞質區由三個部分組成：絲氨酸磷酸化位點、KIEELE元件和谷氨酸脯-氨酸二肽重復序列（EP repeat），其中KIEELE元件參與了LAG-3下游信號轉導，是LAG-3調節T細胞功能所必需的。LAG-3主要配體為組織相容性復合體II類分子（major histocompatibility complex II，MHC II），此外還可與半乳糖凝集素-3（Galectin-3）、肝竇內皮細胞凝集素（LSECtin）、FGL1（fibrinogen-like protein1）等相互作用來調節T細胞應答。

LAG-3是T細胞的一個抑制性免疫檢查點,與PD-1和CTLA-4類似，當LAG-3與配體結合時能負向TCR的活性，調控T細胞的增殖、激活、功能和穩態，包括負向調節CD4+T細胞和CD8+T細胞的增殖和功能，參與調節性T細胞（Treg）抑制性作用。當處于腫瘤環境或慢性感染時，長期的抗原刺激會導致T細胞LAG-3持續高表達，引起T細胞耗竭（exhaustion）。阻斷LAG-3信號通路能促進耗竭T細胞恢復功能，調控T淋巴細胞和抗原呈遞細胞（APCs）的信號通路，在適應性免疫反應中起到重要作用，讓T細胞重新獲得細胞毒性活性，降低調節T細胞抑制免疫反應的功能，從而增強對腫瘤的殺傷效果。因此LAG-3已成為腫瘤免疫治療的一個非常具有潛力的靶點。

LAG3-3靶點藥物研發現狀

 

LAG-3的靶向藥物目前均處于臨床實驗階段，尚無藥物上市，主要有兩類LAG-3調節劑用于治療癌癥和自身免疫性疾病：

 

（1) 可溶性LAG-3重組蛋白（如IMP321），已進臨床階段，作為抗原提呈細胞激活劑增進免疫反應，也可與化療藥物或免疫抑制劑藥物聯合使用以加強患者免疫應答。

 

（2) LAG-3單抗藥物，目前全球有近30款進入臨床試驗，但尚無藥物上市，其中進展最快的是BMS的Relatlimab，已完成II/III期臨床研究試驗，達到了無進展生存期（PFS）的主要研究終點，該試驗評估了Relatlimab與Opdivo（納武利尤單抗）聯合治療先前未經治療的轉移性或不可切除的黑色素瘤患者的療效和安全性。LAG-3單抗目前主要與其它免疫檢查點抑制（如PD-1單抗）聯合使用，現有20項NIH在冊針對LAG-3的臨床試驗中有13項與PD-1抑制劑聯用。
 

LAG-3靶點藥物細胞篩選模型

針對LAG-3靶點藥物開發和靶點研究的需求，我們開發了LAG-3系列藥篩細胞株。

 LAG3/HEK293 CBP74051


Figure 3. Recombinant HEK293 stably expressing human LAG3.


LAG3/CHO CBP74052


Figure 4. Recombinant CHO cells constitutively expressing human LAG3.

 

LAG3/NFAT-Luc/Jurkat CBP74060

Figure  5.  Detect Luciferase assay by Promega Bright-Glo Luciferase Assay System. Jurkat-NFAT-LAG3-Luciferase Reporter cells were stimulated by Jurkat cells,the EC50 was 0.17μg/ml.

 

LAG3/IL2-Luc/Jurkat CBP74079

Figure 6. Dose Response of Anti-LAG3 Neutralizing Antibody in LAG3/lL2 Promoter Reporter-Jurkat Cells, the EC50=2.99μg/ml.